潔凈室（區）環境如何檢驗？

一、潔凈室（區）的定義

潔凈室（區）是指將一定空間范圍內的空氣中的塵粒、微粒子、有害空氣、細菌、微生物等污染物排除，并將室內溫度、潔凈度、室內壓力、氣流速度與氣流分布、照明等在某一需求范圍內，而所給予特別設計的房間。其建筑結構、裝備及其作用均具有減少該房間（區域）內污染源的介入、產生和滯留的功能。不論外在空氣條件如何變化，其室內均能具有維持原先所設定要求的潔凈度、溫濕度及壓力等性能的特性。對于醫療器械而言，潔凈室（區）包括生產區域和檢驗區域。

《無菌醫療器具生產管理規范》（YY0033-2000）標準中對潔凈室（區）定義有了明確的規定，即需要對塵埃及微生物含量進行控制的房間（區域），其建筑結構、裝備及其作用均具有減少對該房間（區域）內污染源的介入、產生和滯留的功能。

二、潔凈室（區）的預期用途

潔凈室（區）最主要的作用在于控制產品所接觸大氣的潔凈度及溫濕度，使產品能在一個良好的環境空間中生產、制造和微生物檢驗，此空間我們稱之為潔凈室（區）。

三、潔凈室（區）的構成

一般情況下，潔凈室（區）是指醫療器械生產和檢驗所需的工作環境，對于生產環節，應包括與生產產品工藝流程相對應的功能間，如注塑間、干燥間等；對于檢驗環節，應包括與檢驗有關的功能間，如陽性對照間、無菌檢驗間和微生物限度間等；為生產服務的輔助功能間，如洗衣間、潔具間等以及連接各功能間的緩沖過渡通道。

四、潔凈室（區）的潔凈度級別和設置原則

（一）潔凈度級別

潔凈度：潔凈環境內單位體積空氣中含大于或等于某一粒徑懸浮粒子的允許統計數。

依據《無菌醫療器具生產管理規范》（YY0033-2000）標準，潔凈室（區）的環境級別分為30萬級、10萬級、萬級和100級。

潔凈度級別	塵埃最大允許數，個/m3	微生物最大允許數
≥0.5μm	≥5μm	沉降菌，個/皿	浮游菌，個/m3
100級	3,500	0	1	5
10,000級	350,000	2,000	3	100
100,000級	3,500,000	20,000	10	500
300,000級	10,500,000	≤60,000	15	――

（二）設置原則

除了上述標準之外，國家食品藥品監督管理局2009年發布的《醫療器械生產質量管理規范》（試行）中分別規定了植入性醫療器械潔凈室（區）設置原則和無菌醫療器械潔凈室（區）設置原則，《體外診斷試劑生產實施細則》（試行）中也規定了相應產品生產環境級別要求，生產企業應結合相應法規要求和技術標準要求識別并確定本企業潔凈環境級別，并驗證后執行。醫療器械法規和標準沒有規定的，生產企業可參照上述要求確定產品生產潔凈級別，或自行驗證并確定產品的生產潔凈級別。

潔凈室（區）潔凈度級別設置原則：

1.采用使污染降至最低限的生產技術，以保證醫療器械不受污染或能有效排除污染。倡導技術進步，建議用先進的生產技術。包括先進的生產工藝、先進的設備、工裝和設施等。在生產過程中盡量減少人為因素，最大程度地使產品不暴露在操作環境中，盡可能避免人與產品的直接接觸。

2.植入和介入到血管內器械，不清洗零部件的加工，末道清洗、組裝、初包裝及其封口，不低于萬級。植入到人體組織、與血液、骨腔或非自然腔道直接或間接接觸器械，（不清洗）零部件的加工、末道清洗、組裝、初包裝及其封口等，不低于10萬級。與人體損傷表面和粘膜接觸器械，（不清洗）零部件的加工、末道精洗、組裝、初包裝及其封口，不低于30萬級。

3.與無菌醫療器械的使用表面直接接觸、不清洗即使用的初包裝材料，宜遵循與產品生產環境的潔凈度級別相同的原則，使初包裝材料的質量滿足所包裝無菌醫療器械的要求。若初包裝材料不與無菌醫療器械使用表面直接接觸，不低于30萬級。對于有要求或無菌操作技術加工的，在萬級下的局部100級潔凈室（區）內。潔凈工作服清洗、干燥和穿潔凈工作服室、專用工位器具的末道清洗與消毒的區域的空氣潔凈度級別可低于生產區一個級別。無菌工作服的整理、滅菌后的貯存應在萬級潔凈室（區）內。

4.醫療器械法規規定，高風險生物活性物料（如強毒微生物、芽胞菌制品、激素類試劑組分、放射性物質）的操作應使用單獨的空氣凈化系統，與相鄰區域應保持負壓，排出的空氣不應循環使用；陰性、陽性血清、質粒或血液制品的處理操作應當在至少萬級環境下進行，與相鄰區域保持相對負壓，并符合防護規定；生產激素類試劑組分的潔凈環境應當采用獨立的專用的空氣凈化系統，且凈化空氣不得循環使用；強毒微生物操作區、芽胞菌制品操作區應與相鄰區域保持相對負壓，配備獨立的空氣凈化系統，排出的空氣不得循環使用。酶聯免疫吸附試驗試劑、免疫熒光試劑、免疫發光試劑、聚合酶鏈反應（PCR）試劑、金標試劑、干化學法試劑、細胞培養基、校準品與質控品、酶類、抗原、抗體和其他活性類組分的配制及分裝等產品的配液、包被、分裝、點膜、干燥、切割、貼膜、以及內包裝等工藝環節，現場核實，至少應在10萬級潔凈環境中進行操作，無菌物料的分裝必須在局部100級潔凈環境下進行。

5.無菌實驗室原則上應設3間萬級下的局部100級潔凈室（區），用作無菌室、陽性對照室和微生物限度室。無菌檢測實驗室原則上應當和潔凈生產區分開設置，有獨立的區域、單獨的空調送風系統和專用的人流物流通道及實驗準備區等。陽性對照室應配備百級潔凈工作臺；如陽性對照室處于非受控環境，應提供驗證資料，并配備生物安全柜。

企業可在啟用的潔凈室（區）入口處張貼潔凈室（區）平面圖，標識潔凈室（區）布局、環境控制級別以及人流物流走向等。

五、潔凈室（區）的日常監測項目

依據《無菌醫療器具生產管理規范》（YY0033-2000）標準，潔凈室（區）的監測項目包括溫濕度、壓力、風速、換氣次數、塵埃粒子數、沉降菌或浮游菌。

其中，潔凈度（沉降菌）的檢驗標準按國家技術監督局發布的《醫藥工業潔凈室（區）沉降菌的測試方法》，采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養基平皿，經若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數，以平板培養皿中的菌落數來判定潔凈環境內的活微生物數，并以此來評定潔凈室（區）的潔凈度。

（一） 沉降菌測試前，被測試潔凈室（區）的溫濕度須達到規定的要求，靜壓差、換氣次數、空氣流速必須控制在規定值內。潔凈室（區）的溫度和相對濕度應與其生產及工藝要求相適應（無特殊要求時，溫度在18℃～26℃，相對濕度在45%～65%之間為宜），同時應滿足測試儀器的使用范圍。

（二） 沉降菌測試前，被測試潔凈室（區）已經過消毒。測試狀態有靜態和動態兩種，測試狀態的選擇必須符合生產的要求，并在報告中注明測試狀態。靜態測試時，室內測試人員不得多于2人。靜態測試時，培養皿暴露時間為30min以上；動態測試時，培養皿暴露時間為不大于4h。

（三） 將已制備好的培養皿放置在預先確定取樣點，打開培養皿蓋，使培養基表面暴露0.5h，再將培養皿蓋上蓋后倒置。全部采樣結束，將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。在30～35℃培養，時間不少于3天。用肉眼直接計數，然后用5～10倍放大鏡檢查，是否有遺漏。

七、影響潔凈室（區）潔凈度的主要因素

（一）醫療器械產品自身特性

（二）醫療器械生產工藝

（三）人員、設施衛生要求

由于患者或工作人員自身帶菌而污染或由于和非完全無菌的用具，器械和人的接觸而污染

（四）大氣環境

由于空氣中所含細菌的沉降、附著或被吸入而污染

（五）其他

由于昆蟲等其他因素而污染細菌還可能產生毒性物質、色素等代謝產物